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Hamamatsu Photonics K.K. a développé une nouvelle méthode de balayage par fluorescence 3D appelée « Zyncscantm » qui réalise un balayage de plan X-Z utilisant une nappe lumineuse pour des dosages par fluorescence cellulaires dans des microplaques
Hamamatsu Photonics K.K. (TOKYO : 6965) a développé une nouvelle méthode de balayage par fluorescence 3D appelée « Zyncscantm » qui réalise un balayage de plan x-z utilisant une nappe lumineuse pour des dosages par fluorescence cellulaires dans des microplaques. Cette technologie fournit un balayage de plan x-z utilisant une nappe lumineuse pour une microplaque entière à 96/384/1536 puits, ce qui permet aux utilisateurs d'obtenir des images par fluorescence 3D de puits entiers à une résolution de voxels xy : 2-3 ?m et z : 6-7 ?m pour une épaisseur de ? 300 ?m à partir du fond du puits en seulement quelques minutes par couleur. Cette technologie permet également une séparation à très haut niveau des signaux de fluorescence des cellules de l'arrière-plan, ce qui permet d'obtenir des images des cellules à fluorescence dans des milieux de culture de cellules contenant du sérum et avec des colorants fluorescents (autrement dit, inutile d'éliminer les colorants fluorescents).
Contexte du développement
En matière de découverte et de développement de médicaments, il est de plus en plus nécessaire d'utiliser des modèles de culture de cellules in vitro plus pertinents sur le plan physiologique. Ils comprennent des cellules primaires, des cellules dérivées du patient, des cellules de modélisation de la maladie dérivées de cellules souches pluripotentes induites humaines (Induced pluripotent stem cells, iPSC), des co-cultures de différents types de cellules, et des cultures 3D telles que des sphéroïdes et des organoïdes. Afin de développer et de promouvoir des dosages et des dépistages phénotypiques utilisant ces modèles cellulaires pertinents sur le plan physiologique, il fallait développer de nouveaux types d'instruments pour faciliter l'imagerie par fluorescence à haut débit de cultures cellulaires 2D et 3D hétérogènes. Pour répondre à ce besoin, nous avons développé la technologie ZyncscanTM qui réalise un balayage de plan x-z en utilisant une nappe lumineuse comme microplaque.
Caractéristiques des dosages par fluorescence cellulaires en microplaque utilisant la technologie Zyncscantm
| 1) | Cytométrie par fluorescence à haut débit pour une culture de cellules hétérogènes monocouche 2D | |
| Un seul balayage de 120 secondes (une seule couleur) pour une microplaque entière à 96/384/1536 puits permet la cytométrie par fluorescence de toutes les cellules individuelles dans tous les puits. | ||
| 2) | Des analyses d'un seul sphéroïde utilisant des informations de profondeur (diamètre de sphéroïde ; ? 200 ?m) | |
| Un seul balayage (en seulement quelques minutes) pour une microplaque permet des images par fluorescence de sphéroïdes (un seul ou de multiples sphéroïdes dans un puits) dans tous les puits dans une microplaque à 96/384/1536 puits. L'intensité de fluorescence, l'épaisseur et le volume complets de chaque sphéroïde individuel sont estimés à partir des images. | ||
| 3) | Des images par fluorescence en 3D (? 300 ?m) | |
| Avec un seul balayage (en seulement quelques minutes), on obtient des images par fluorescence 3D (300 ?m à partir du fond d'un puits) de tous les puits dans une plaque. La résolution optique de l'image est comparable à l'objectif 2x d'un microscope à fluorescence conventionnel dans les axes x et y et d'un objectif 10x de microscopie à fluorescence confocal dans l'axe z. | ||
| 4) | Dans le milieu / Aucune mesure d'élimination du colorant | |
| Mesure de la fluorescence cellulaire dans le milieu contenant le sérum et avec des colorants fluorescents (inutile d'éliminer les colorants fluorescents), ce qui permet aux cellules de rester saines pendant la durée de l'expérience. | ||
Perspectives futures
Hamamatsu Photonics K.K. a développé un instrument de fluorescence pour des dosages cellulaires équipés de la technologie Zyncscantm, CYTOQUBEtm, un cytomètre à microplaque à nappe lumineuse. Nous comptons initier des expériences de validation et d'application dans plusieurs sites de recherche en découverte et développement de médicaments début 2020. Le lancement de CYTOQUBEtm est prévu pour la fin du prochain exercice fiscal (septembre 2020).
Nous présenterons un prototype du CYTOQUBEtm (cytomètre à microplaque à nappe lumineuse) aux conférences suivantes.
| WPC (World Preclinical Congress) |
| 17-20 juin 2019, Boston, MA, États-Unis |
| CYTO |
| 22-26 juin 2019, Vancouver, BC, Canada |
Pour obtenir des informations plus détaillées, rendez-vous sur
https://www.hamamatsu.com/all/en/news/featured-products_technologies/2019/20190610000000.html
Hamamatsu Photonics K.K.
Hamamatsu Photonics K.K. est un fabricant de dispositifs photoniques de premier plan. Nous concevons, fabriquons et vendons des capteurs optiques, des sources lumineuses, des composants optiques, des caméras, des systèmes de photométrie, et des systèmes de mesure/analyse.
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